В статье представлены результаты определения лекарственной чувствительности к ПТП 120 штаммов Mycobacterium tuberculosis (МБТ), выделенных от больных с впервые установленным диагнозом туберкулеза легких до
начала химиотерапии и постоянно проживающих в городе Москве. При тестировании ЛЧ МБТ к препаратам основного
и резервного рядов в 50% случаев штаммы микобактерий обладали устойчивостью к ПТП. Проведенное исследование показало, что бедаквилин in vitro обладает высокой противотуберкулезной активностью как в отношении чувствительных,
так и устойчивых штаммов МБТ. В исследовании была установлена принадлежность штаммов МБТ к различным генетическим семействам. Среди изученных клинических штаммов преобладала генетическая группа Beijing (64,2%).
Сравнительный анализ результатов определения значений МИК бедаквилина в отношении данных штаммов МБТ не
выявил взаимосвязи между результатами тестирования ЛЧ микобактерий к ПТП и их принадлежностью к генетическим
семействам. Согласно критическим концентрациям, рекомендованным ВОЗ, все исследованные штаммы, выделенные до начала лечения, определены как чувствительные к бедаквилину.
Ключевые слова: Mycobacterium tuberculosis, бедаквилин, минимальная ингибирующая концентрация, лекарственная
устойчивость, генетическое семейство
Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации № 6 от 13.03.2020 г. «О дополнительных мерах по снижению рисков распространения COVID-19» утверждена возможность выявления SARS-Cov-2 на базе лабораторий, имеющих санитарно-эпидемиологическое заключение на работу с III–IV группой патогенности с использованием методов, не предполагающих выделение возбудителя с требованием к администрации медицинских учреждений обеспечить
лабораторную диагностику новой короновирусной инфекции в условиях ухудшения эпидемической обстановки в РФ и, в частности, в Москве. Перед МНПЦ борьбы с туберкулезом была поставлена задача организации, оснащения и обеспечения работы ПЦР-лаборатории для выявления SARS-Cov-2 в диагностическом материале сотрудников и пациентов центра, а также лиц с подозрением на COVID-19, обследованных с привлечением мобильных бригад скорой медицинской помощи. Для этого в кратчайшие сроки на базе корпуса № 24 Клиники № 2 был разработан и успешно реализован план реконструкции и оснащения ПЦР лаборатории для диагностики новой коронавирусной инфекции COVID-19.
Ключевые слова: COVID-19, лабораторная диагностика
В статье представлены результаты ретроспективного исследования культур M. tuberculosis (МБТ), полученных от больных туберкулезом легких с множественной лекарственной устойчивостью, зарегистрированных или уже состоящих на
диспансерном учете в 2014 году в городе Москве. С помощью сполиготипирования и молекулярных тестов для выявления
мутаций, ассоциированных с лекарственной устойчивостью (ЛУ) к изониазиду, рифампицину, фторхинолонам, аминогликозидам/попипептиду, была определена принадлежность 274 культур МЛУ МБТ к генетическим группам Beijing и non-Beijing, а также детерминанты ЛУ, что позволило провести анализ и сравнить генетическую структуру штаммов. Изученные
культуры чаще всего (81%) относились к семейству Beijing, их ЛУ обусловлена мутациями, которые, по данным литературы, связаны с высоким уровнем устойчивости возбудителя к противотуберкулезным препаратам, формируя тем самым
высоко трансмиссивный, эпидемиологически опасный и трудно поддающийся лечению штамм МБТ.
Ключевые слова: M. tuberculosis, сполиготипирование, генетические семейства, лекарственная чувствительность
По данным российских исследований, доля C. difficile ассоциированной инфекция (КДИ) среди антибиотико-ассоциированной диареи (ААД) составляет от 28,7 до 51,5%, однако КДИ, вызванная штаммами C. difficile гипервирулентного типа 027/NAP1/BI мало изучена. Несмотря на то что основными факторами развития заболевания являются прием антибактериальных препаратов и госпитализация, имеется мало работ, изучающих КДИ среди больных туберкулезом на фоне лечения ПТП. С помощью тест-системы Xpert С. difficile (Cepheid, США) исследовано 57 образцов кала, полученных от 57 пациентов с подозрением на КДИ, находящихся на стационарном лечении в отделениях ГБУЗ «МНПЦ борьбы с туберкулезом ДЗМ». Среди обследованных пациентов КДИ была обнаружена в 40,4%, из них в 91% случаев этиологическую роль в развитии заболевания играли штаммы С. difficile предположительно типа 027/NAP1/BI.
Ключевые слова: C. difficile-ассоциированная инфекция, C. difficile тип 027/NAP1/BI, диарея, противотуберкулезная терапия, антибиотико-ассоциирования диарея
Изучена лекарственная чувствительность 258 штаммов быстрорастущих микобактерий комплекса M. fortuitum с использованием метода серийных микроразведений к 15 химиопрепаратам (Sensititre RAPMyco). Установлено, что M. fortuitum и M. peregrinum, входящие в комплекс, обладают сходной чувствительностью/резистентностью к исследованным препаратам. При этом к ряду химиопрепаратов они сохраняют чувствительность, а в ряде случаев при большом числе резистентных культур имеется довольно значительное количество штаммов с «промежуточной» чувствительностью, что
создает «резерв» для химиотерапии.
Ключевые слова: быстрорастущие нетуберкулезные микобактерии, комплекс M. fortuitum, лекарственная чувствительность
Исследована сравнительная активность флуконазола, итраконазола, вориконазола, позаконазола (препараты группы триазолов), анидулафунгина, каспофунгина, микафунгина (препараты группы эхинокандинов) и амфотерицина В против
330 штаммов из 14 видов возбудителей кандидоза, выделенных в клинике туберкулеза (кровь, содержимое легочных и плевральных полостей, респираторный материал). Даны рекомендации по целесообразности проведения тестирования чувствительности in vitro к 7 широко применяемым в терапии глубокого кандидоза антимикотикам (флуконазол, итраконазол, вориконазол, анидулафунгин, каспофунгин, микафунгин, амфотерицин В) у основных и редких возбудителей кандидоза, в зависимости от установленного уровня их исходной чувствительности. При выборе препарата для лечения кандидоза необходимо учитывать наличие вариативной или сниженной чувствительности к нему у некоторых Candida spp. Выбор триазольного препарата должен основываться на данных лабораторных исследований (точная видовая идентификация и при необходимости определение чувствительности к антимикотикам), в противном случае терапия может оказаться неэффективной.
Ключевые слова: чувствительность грибов рода Candida к противогрибковым препаратам, диагностика и терапия бронхолегочных и диссеминированных кандидозов
С целью оценить влияние генотипа N-ацетилтрансферазы 2 на риск лекарственного поражения печени у больных туберкулезом, а также сопоставить результаты прогноза по клиническим и фармакогенетическим данным проведено проспективное когортное исследование, включившее 49 больных туберкулезом органов дыхания. У пациентов первой когорты (25 чел.) генотип ацетилирования соответствовал медленному типу ацетилирования, второй (24 чел.) – быстрому. Частота лекарственного поражения печени при проведении интенсивной фазы противотуберкулезной химиотерапии в первой
когорте составила 56,0%, во второй 20,8% (ОШ 2,69; 95%ДИ 1,14–6,31). Оценка риска гепатотоксических реакций на основе
генотипа N-ацетилтрансферазы была сопоставимой с результатами применения клинической шкалы оценки риска; при
совместном применении шкалы и фармакогенетического тестирования точность прогноза повышалась до 72,3% (95%ДИ
58,1–83,2%).
Ключевые слова: противотуберкулезная химиотерапия, лекарственное поражение печени, фармакогенетическое тестирование, тип ацетилирования, факторы риска
В статье представлены результаты определения значений минимальной ингибирующей концентрации (МИК) бедаквилина в отношении чувствительных к противотуберкулезным препаратам (ПТП) основного ряда 100 клинических штаммов
M. tuberculosis на разных питательных средах. Исследования проводили в жидкой среде Middlebrook 7H9 (M7H9) с использованием автоматизированной системы BACTEC™ MGIT™ 960 и 96-луночного планшета, а также на агаровой среде Middlebrook 7H11 (M7Н11). На основании полученных данных определены диапазоны значений МИК: в жидкой среде M7H9 − от 0,03 до 0,25 мкг/мл; на агаре М7Н11 − от ≤ 0,015 до 0,03 мкг/мл. В отношении чувствительных штаммов M. tuberculosis установлены пограничные значения МИК: 0,25 мкг/мл в жидкой среде M7H9 и 0,03 мкг/мл на агаровой среде M7Н11.
Ключевые слова: M. tuberculosis, бедаквилин, минимальная ингибирующая концентрация
В статье рассмотрены современные представления о принципах определения лекарственной чувствительности
микроорганизмов, критериях ее оценки, применяемых в бактериологии. Представлены данные ретроспективного анализа результатов чувствительности/устойчивости 593 штаммов M. tuberculosis к препаратам группы фторхинолонов (ципрофлоксацин, офлоксацин, левофлоксацин и моксифлоксацин), полученных с помощью автоматизированной системы
BactecтмMGITтм 960 в разные периоды времени, когда тестировали к различным критическим концентрациям
препаратов, рекомендованных ВОЗ. Проанализирована закономерность перекрестной устойчивости штаммов M. tuberculosis к фторхинолонам. Установлено, что процент перекрестной устойчивости изменялся в зависимости от применяемых критических концентраций препаратов. При лечении туберкулеза с МЛУ/ШЛУ возбудителя с помощью химиотерапии, включающей препараты из группы фторхинолонов, необходимы более полные сведения об уровне лекарственной устойчивости M. tuberculosis к данным препаратам. Определение лекарственной чувствительности с использованием критических концентраций препаратов должно быть дополнено методами количественного определения (определение МИК).
Ключевые слова: микобактериология, критическая концентрация, фторхинолоны, перекрестная устойчивость M. tuberculosis
Изучено 139 культур быстрорастущих НТМБ комплекса M. chelonae (90 – M. chelonae и 49 – M. abscessus) методом
серийных микроразведений в тест-системе Sensititre RAPMyco. Установлено, что M. abscessus были чаще устойчивыми к большинству исследованных химиопрепаратов, что в первую очередь подтверждено при статистической обработке данных о
числе резистентных штаммов этих видов и анализом кривых выживания Каплана-Мейера. Следует подчеркнуть, что эти данные часто совпадают, а часто отличаются от приведенных в других исследованиях. Это объясняется в первую очередь тем, что в разных регионах мира имеются существенные особенности циркулирующих между неживой природой, животными и человеком НТМБ (спонтанные мутации, частота заболеваний с применением разных видов лечения и т.д.).
Ключевые слова: быстрорастущие нетуберкулезные микобактерии, M. chelonae, M. abscessus, лекарственная чувствительность
Отсутствие данных о лекарственной чувствительности (ЛЧ) M. tuberculosis к противотуберкулезным препаратам
препятствует назначению адекватной терапии, в том числе в послеоперационном периоде. Комплексный подход к
лабораторному исследованию операционного материала с использованием молекулярных технологий и микробиологических методов позволяет получить более полную информацию о свойствах возбудителя. Исследование 123 образцов
операционного диагностического материала показало, что у пациентов с туберкулезом легких частота обнаружения ДНК
МБТ в образцах превосходила частоту получения культуры МБТ в 8,5 раза. Сравнение полученных данных с ретроспективным анализом результатов выявления и определения ЛЧ МБТ в респираторном материале до операции показало, что с помощью молекулярно-генетических методов в операционном материале впервые удалось подтвердить этиологическую
природу туберкулеза у 42,3% пациентов, из которых в 92,3% была определена ЛЧ МБТ к химиопрепаратам с помощью «ТБ ТЕСТ». Кроме этого, в связи с трудностью выделения культур МБТ из операционного материала показана возможность использования этого диагностического материала для проведения эпидемиологических исследований.
Ключевые слова: диагностика туберкулеза, операционный материал, микробиологические методы, молекулярно-генетические методы
Цель исследования – оценить вклад в диагностику туберкулеза и определение лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза у больных ВИЧ-инфекцией методов, используемых в ГБУЗ «Московский научно-практический центр борьбы
с туберкулезом Департамента здравоохранения города Москвы» для ускоренной лабораторной диагностики туберкулеза и
микобактериозов. В 2014–2016 гг. исследовано 837 проб различного диагностического материала, полученного от 539 пациентов с коинфекцией ВИЧ/туберкулез. Больные были разделены на две группы: впервые выявленные больные туберкулезом (группа I) и больные с рецидивирующим и хроническим течением туберкулеза (завершившие ранее основной курс или прервавшие лечение) из различных групп диспансерного учета (ГДУ) – группа II.
При изучении выявления микобактерий туберкулеза (МБТ) из диагностического материала различными методами (микроскопия, посев, поиск ДНК МБТ) установлено, что из материала впервые выявленных больных туберкулезом достоверно чаще выделяли культуру (20,8%) или ДНК МБТ (24,3%), разницы при использовании этих двух методов выявлено не было (p > 0,05). Напротив, из диагностического материала больных различных ГДУ достоверно чаще выявляли ДНК МБТ (26,4%), в то время как различий в частотах положительного результата люминесцентной микроскопии (12,1%) и посева (14,3%) выявлено не было. При этом для Xpert MТВ/Rif и посева в BACTEC™ MGIT™ 960 получили высокую согласованность результатов (около 90%) независимо от принадлежности больных к группе I или группе II (κI = 0,684, κII = 0,604; р < 0,05).
Ключевые слова: конфекция ВИЧ/туберкулез, диагностика, микробиологические методы, молекулярно-генетические методы
В исследовании проведено изучение возможностей иммунологических тестов в диагностике туберкулезной инфекции
у людей, живущих с ВИЧ. Изучены результаты обследования 345 больных ВИЧ-инфекцией. Кроме стандартного клинико-лабораторного обследования всем выполняли иммунологические тесты T-SPOT®.TB и кожную пробу с антигеном туберкулезным рекомбинантным (АТР). При использовании лабораторного теста T-SPOT®.TB у больных ВИЧ-инфекцией с установленным впоследствии диагнозом туберкулеза результаты были положительными у 115 (54%) больных (95%ДИ 47,0–60,6%), при применении кожной пробы с АТР у 51 (23,9%, 95%ДИ 18,7–30,1%). В группе ВИЧ-инфицированных лиц без активного туберкулеза положительные результаты лабораторного теста получены у 13 (9,9%) пациентов (95%ДИ 5,9–16,1%), при использовании кожной пробы с АТР – у 14 (10,6%, 95%ДИ 6,4–17,0%); тесты продемонстрировали хорошую согласованность (κ = 0,6, р < 0,001), что свидетельствует об их равных возможностях в выявлении туберкулезной инфекции у людей, живущих с ВИЧ.
Ключевые слова: туберкулез, ВИЧ-инфекция, лица, живущие с ВИЧ, иммунологические методы диагностики
В работе представлен протокол комплексного исследования диагностического материала от больных ВИЧ-инфекцией
с целью ускоренной эффективной диагностики латентной туберкулезной инфекции, туберкулеза, микобактериозов и
определения лекарственной устойчивости возбудителя бактериологическими, молекулярно-генетическими методами.
Апробированы и внедрены в практику порядок обследования больных ВИЧ-инфекцией с туберкулезом и подозрением на туберкулез в стационарах МНПЦБТ и порядок обследования больных ВИЧ-инфекцией в кабинетах противотуберкулезной помощи в филиалах МНПЦБТ.
Ключевые слова: микобактерии туберкулеза, ВИЧ-инфекция, нетуберкулезные микобактерии, интерферон-гамма, бактериологические, молекулярно-генетические и иммунологические методы
В обзоре дана характеристика современного состояния исследований в области изучения лекарственной чувствительности M. tuberculosis: методы, результаты изучения чувствительности/устойчивости к основным препаратам, используемым для лечения туберкулеза, значение оценки уровня устойчивости/чувствительности штаммов M. tuberculosis,
выделенных от больных, для определения оптимальных схем химиотерапии.
Ключевые слова: M. tuberculosis, лекарственная чувствительность/устойчивость
Разработан и внедрен в повседневную практику алгоритм микобактериологического и молекулярно-генетического обследования пациентов, применяемый для диагностики туберкулеза и микобактериозов в Московском научно-практическом Центре борьбы с туберкулезом Департамента здравоохранения города Москвы.
Исследование единого посевного осадка диагностического материала с применением молекулярно-генетических методов позволяет уже через 48 часов предвидеть наличие МЛУ и/или ШЛУ M. tuberculosis и при получении роста МБТ из
диагностического материала на жидкой питательной среде (BACTEC™ MGIT™ 960) проводить ускоренное определение лекарственной чувствительности (ЛЧ) к препаратам I и/или II ряда. Такая практика позволяет провести полноценное лабораторное обследование пациента и получать результаты посева и определения ЛЧ к препаратам I и/или II рядa в течение менее одного месяца.
Ключевые слова: микобактерии туберкулеза, диагностика туберкулеза, современные ускоренные микробиологические и
молекулярно-диагностические методы
Проанализированы результаты применения кожной пробы с препаратом Диаскинтест® и лабораторного теста T-SPOT®.
TB у 75 больных ВИЧ-инфекцией с туберкулезом легких. Показано, что при использовании T-SPOT®.TB доля положительных результатов в целом составляет 60,0% (95% ДИ 48,7–70,4%), при применении кожной пробы – 22,7% (95%ДИ 14,6–33,4%). Выявлена умеренная корреляционная связь результатов обоих тестов и количеством CD4+ Т-клеток. Процент положительных результатов T-SPOT®.TB у больных с количеством CD4+ Т-клеток от 50 кл/мкл и более достоверно выше таковых у пациентов с содержанием CD4+ Т-клеток менее 50 кл/мкл (81,1% против 9,1%, по критерию χ2 , p < 0,01). Результаты двух тестов совпали в 48,0% случаев и были дискордантны в 52,0%, согласованность тестов была низкой (κ = 0 ,17; р < 0,05). Представленные результаты позволяют сделать заключение о высокой эффективности применения теста T-SPOT®.TB у больных сочетанной
патологией ВИЧ-туберкулез. Ограничением для использования этого теста является выраженная иммуносупрессия с количеством CD4+ Т-клеток менее 50 кл/мкл.
Ключевые слова: иммунодиагностика, туберкулез, ВИЧ инфекция, CD4+ Т-клетки, Диаскинтест, T-SPOT®.TB
С использованием панели клинических штаммов M. tuberculosis, различающихся по спектру лекарственной устойчивости, определены критические концентрации шести противотуберкулезных препаратов резервного ряда. Для ускоренной оценки лекарственной чувствительности M. tuberculosis в автоматизированной системе BACTEC™ MGIT™ 960 критические концентрации левофлоксацина, моксифлоксацина, гатифлоксацина, канамицина, амикацина и капреомицина составили 1,0, 0,25, 0,25, 2,5, 1,0 и 2,5 мкг/мл, соответственно. Для оценки лекарственной чувствительности M. tuberculosis классическим методом абсолютных концентраций на плотной среде Левенштейна-Йенсена критические концентрации левофлоксацина, моксифлоксацина и гатифлоксацина составили 2,0, 0,75, 0,75 мкг/мл, соответственно.
Ключевые слова: критическая концентрация, резервные
противотуберкулезные препараты, лекарственная устойчивость.